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Plate-forme Vecteurs Viraux
et Transfert de Gènes

La plate-forme Vecteurs Viraux et Transfert de Gènes est un service de production de vecteurs viraux utilisés en transfert de gènes.
L’activité porte sur la production à façon de virus défectifs pour la réplication : lentivirus, rétrovirus et adénovirus. Dans le respect de la règlementation sur les OGM, la plate-forme conseille et forme les clients/utilisateurs sur les vecteurs viraux en amont et en aval des productions. La structure facilite aussi l’accès des utilisateurs à un local confiné L3. La plate-forme est gérée par l'IFR94 et l'Université Paris Descartes. Elle est aussi une plate-forme de la Fondation Imagine. Le service s'adresse aux chercheurs, post-doctorants et étudiants des laboratoires de recherche du territoire Français et plus particulièrement de l'Université Paris Descartes.
La plate-forme a été crée en 2009. Elle produit entre 40 et 50 virus recombinants à façon par an, depuis trois ans.

Adresse :
Plate-forme vecteurs viraux et transfert de gènes
IFR 94 (IRNEM) - Université Paris Descartes
Plateforme Vecteurs Viraux et Transfert de Gènes de l'IFR 94
Pavillon Leriche, Porte 9
96 Rue Didot 75014 Paris
Tél : 01 72 60 63 42
Fax IFR 94 : 01 72 60 63 30
sylvie.fabrega@inserm.fr
Livraisons : bureau RDC-H (pièce RH072), puis RDC bas.

L'activité de la plateforme vecteurs viraux et transfert de gènes est momentanément interrompue pour la préparation de son déménagement vers le site de Broussais, Paris 14ème.
La plateforme sera localisée 96 Rue Didot , Pavillon Leriche, Porte 9 , 75014 Paris, à partir de la semaine 48 du calendrier 2012.
La date de reprise d'activité n'est pas encore connue. Toute demande de production ou de recherche d'information est à adresser à : sylvie.fabrega@inserm.fr

Descriptions des services proposés :
° Veille technologique sur les vecteurs viraux.
° Conseil et aide à la conception de vecteurs d’expression viraux.
° Production de vecteurs viraux pour le transfert de gènes : Lentivirus, Rétrovirus et Adénovirus.
° Formation des utilisateurs à l’utilisation des OGM viraux, dans le cadre de la réglementation du Haut Conseil des Biotechnologies (HCB).
° Accès à un plateau L3.
° Echanges avec d'autres plates-formes académiques ou avec des sociétés de biotechnologie spécialisées, pour la production de vecteurs à usage clinique.

Personnel :
Responsable scientifique : Jean-Pierre de VILLARTAY - 01 44 49 50 81
Responsable technique : Sylvie FABREGA - 01 72 60 63 42
Technicien : Alexandre BARON - 01 72 60 63 42

Locaux et Matériel plate-forme :
La plate-forme dispose d’un bureau ainsi que de locaux L1 et L2 dédiés dans la Faculté de Médecine Paris Descartes sur le site de l’hôpital Necker Enfants-Malades, Paris 15ème. Elle accède aussi à un L3 sur le Centre de Recherches Biomédicales des Cordeliers, Paris 6ème. Les activités L1, L2 et L3 seront rassemblées sur le site de l’Hôpital Broussais Paris 14ème, au Pavillon Leriche à partir de septembre 2012.
Principaux équipements en L1, L2 et L3 : 2 ultracentrifugeuses, 4 centrifugeuses dont 3 réfrigérées, 2 PSM II, 4 incubateurs CO2, 1 incubateur de bactériologie, 2 microscopes inversé à épifluorescence, 1 système de chromatographie FPLC relié à un ordinateur, 1 spectrophotomètre, 1 pH mètre, 1 collecteur de fraction, 1 réfractomètre, du matériel pour l’étude de l’ADN et des protéines (cuves et générateurs), container de stockage azote, +4°C, -20°C et -80°C. Le bureau est équipé de trois postes de travail informatiques.

Partenariats et financements :
IFR94, Université Paris Descartes, Fondation Imagine, InsermU845, ARC, Centre de recherche des Cordeliers, GIS-IBISA.
La plate-forme a été reconnue comme structure émergente par le GIS-IBiSA en 2008 (http://www.ibisa.net/) et a reçu un financement d’encouragement à l’émergence en 2009.

Prestations de productions de vecteurs viraux :
Types de virus produits :

• Adénovirus (Ad5) ΔE1/ΔE3,
• Lentivirus HIV-1 ΔU3 SIN,
• Rétrovirus murin Mo-MLV

La production d’AAV est en projet.

Prestations de productions de virus 2012

Vecteurs viraux usuels :
La plate-forme peut fournir, dans certains cas, des lots de vecteurs déjà prêts : lentivirus-GFP, adénovirus- GFP, adénovirus-CRE recombinase. Nous contacter.

Délai par type de production :
 Lentivirus et Rétrovirus : 3 semaines
Adénovirus : 2 mois
Nous contacter pour connaître les délais en cours.

Informations et modalités de prise en charge d’une demande de production virale :
Pour toute demande d’information, adressez-vous à Sylvie Fabrega, à l’adresse e-mail : sylvie.fabrega@inserm.fr
Prise en charge d’une demande de production

Tarifs 2012 :
Nous consulter directement.

Publications scientifiques associant la plate-forme :

1. Christine Salaün et al. Identification of a Novel Transport-independent Function of PiT1/SLC20A1 in the Regulation of TNF-induced Apoptosis. The Journal of Biological Chemistry. vol. 285, no. 45, pp. 34408–34418, November 5, 2010.
2. Frédérique Rau et al. Misregulation of miR-1 processing is associated with heart defects in myotonic dystrophy. Nature Structural & Molecular Biology 2011.
3. Vanessa Sancho-Shimizu et al. Herpes simplex encephalitis in patients with autosomal recessive and dominant TRIF deficiency” J Clin Invest. 2011 Dec; 121(12):4889-902.
4. Mylène Heinis et al. HIF1alpha and pancreatic beta-cell development. FASEB J. 2012 Mar 20.
5. Soggia A. et al.  Activation of the transcription factor carbohydrate responsive element-binding protein by glucose leads to increased pancreatic beta cells differentiation. Diabetologia, 2012, under press

Consultation de documents
Quelques applications des vecteurs viraux ainsi que des protocoles récents sont présentés dans ces deux livres qui peuvent être consultés au 1er étage du bâtiment Faculté, porte 204 :

 Documents à télécharger
- Documents du haut commissariat des biotechnologies (HCB) concernant les adénovirus, les AAV, les lentivirus et les rétrovirus
- Nature de la séquence clonée et principes de détermination des dangers
- Arrêté du 16 juillet 2007 fixant les mesures techniques de prévention, notamment de confinement, à mettre en œuvre dans les laboratoires de recherche, « … » où les travailleurs sont susceptibles d’être exposés à des agents biologiques pathogènes.

Liens
- Informations juridiques consernant la mise en oeuvre des OGM (Site Inserm)
- http://www.enseignementsup-recherche.gouv.fr